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  • 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)查验解决计划

    公布时间:2021-09-10      阅读次数:1576    分享:

           本年8月,广东省一家肠粉店发作食物中毒,11名顾客吃了店内河粉后,呈现吐逆、腹泻等病症,送医后1人挽救有效逝世,2人病情较重,其他职员暂无生命风险。

           经查问拜访,这起食物中毒的祸首祸首是“椰毒假单胞菌”,中毒缘故原由是因为某些菌株能够发生一种叫“米酵菌酸”的毒素,一旦吃了含有这类毒素的食物,就会施展阐发为恶心、吐逆、腹泻、头晕、满身有力,紧张时会呈现黄疸、肝肿大、皮下出血、呕血、惊厥抽搐等病症,最紧张的会呈现休克甚至灭亡。

           “椰毒假单胞菌”,全称椰毒假单胞酵米面亚种Pseudomonas cocovenenans subsp. Farinofermentans,是一种存在于酵米面、蜕变鲜银耳及其他淀粉类发酵产物中的食源性致病菌,

           因为椰毒假单胞酵母菌酵米面亚种不是国内公然揭晓和认可的细菌分类迷信称号,1999年划分为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌Burkholderia gladioli的一个病原型,今朝现行尺度GB/T 4789.29-2003《食物卫生微生物学查验 椰毒假单胞菌酵米面亚种查验》。2018年9月国度卫生安康委员会公布的《食物平安国度尺度 食物微生物学查验 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)查验(征求定见稿)》中,将该菌举行改名,同时新增分散培育种植提拔基mPDA同PCFA用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)的分散。

    详细查验流程如下:

    1. 查验流程(前增菌以及选择性分散历程)



    2. 查验流程初筛尝试

          自选择性琼脂平板上划分挑取5个以上典型或可疑菌落,分区划线卵黄琼脂平板,36℃±1℃培育种植提拔。挑取培育种植提拔18~24 h的菌落举行革兰氏染色及氧化酶试验。关于革兰氏染色阳性、氧化酶试验阳性的菌继续培育种植提拔至48 h±2 h,关于卵磷脂酶阳性,带有虹彩环的单个菌落,接种PDA平板,36℃±1℃培育种植提拔24 h±2 h。


    (环凯货号027162)卵黄琼脂(卵磷脂酶试验)

    唐菖蒲伯克霍尔德氏菌恒温荧光扩增试剂盒快捷检测法

    1. 手艺原理:哄骗两对特殊引物和具备链置换活性的BstDNA聚合酶,使模板两端引物结合处轮回呈现环状单链结构,引物顺遂与模板结兼并举行链置换扩增反响,实现在恒温前提下(60~65℃)举行接连快捷扩增。反响参加显色批示剂,阴阳性结果显色差距显著,可间接经由历程颜色变更判读结果。

    2. 产物劣势

    操作简捷:简单加样操作,快捷上手;

    快捷省时:取得菌液后1 h实现检测

    活络度高:最低检测限8CFU。

    特同性强:哄骗靶基因序列上的多个自力地区设想多条引物,保障扩增反响的高度特同性

    结果简单可视:肉眼察看颜色,可判定结果。

    “+”代表阳性;“-”代表阳性

    3. 产物组分:

    组分称号

    规格×数目

    唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检测试剂(冻干)

    3排× 8管

    复溶液

    650 μL × 1管

    阳性对照(冻干)

    1管

    阳性对照(冻干)

    1管

    裂解液

    1 mL × 1管

    显色批示剂

    80 μL×1管

    超纯水

    1 mL×1管

    注明书

    1份

    4. 历程图解:

    5. 产物结果

    “+”代表阳性;“-”代表阳性

    相关产物信息

    用途

    产物编号

    产物称号

    包装规格

    快捷查验和鉴定

    KJD16L

    唐菖蒲伯克霍尔德氏菌核酸快捷检测试剂盒

    核酸快捷检测试剂盒

    24测试/盒

    选择性增菌

    021055

    GVC增菌液

    250g/瓶

    分散培育种植提拔

    021054

    改进土豆葡萄糖琼脂培育种植提拔基(mPDA)

    250g/瓶

    021059

    PCFA培育种植提拔基根蒂根基

    250g/瓶

    SR0690

    PCFA培育种植提拔基配套试剂

    10支/盒

    卵磷脂酶试验

    027161

    卵黄琼脂根蒂根基(顺应GB4789.29-2003)

    250g/瓶

    卵磷脂酶试验

    027162

    卵黄琼脂根蒂根基(顺应GB4789.29修订定见稿)

    250g/瓶

    纯培育种植提拔

    021057

    土豆葡萄糖琼脂培育种植提拔基

    250g/瓶

    状态察看

    029010

    革兰氏染色液

    4种×10mL/盒

    氧化酶试验

    029172

    氧化酶试剂

    50测试/盒

    能源试验和产毒素试验

    021056

    土豆葡萄糖半固体琼脂

    250g/瓶


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