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食物微生物查验副溶血性弧菌查验经常使用培育种植提拔基原理解析

公布时间:2021-11-26    阅读次数:989

3%氯化钠碱性卵白胨水

卵白胨提供碳源、氮源、维生素、成长因子;高含量氯化钠和高pH值能够抑止非弧菌类细菌成长,不影响副溶血性弧菌成长。

硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂

配方中多价卵白胨、酵母膏粉提供碳氮源、维生素和成长因子;氯化钠可刺激弧菌的成长;蔗糖是可发酵的糖类;胆酸钠、牛胆汁粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH可抑止革兰氏阴性菌和大肠菌群;硫代硫酸钠与柠檬酸铁反响作为检测硫化氢发作的批示剂;溴麝香草酚蓝和麝香草酚蓝是pH批示剂;琼脂是培育种植提拔基的凝集剂 。

副溶血性弧菌不发酵蔗糖,不会使培育种植提拔基pH升高,因此在该培育种植提拔基上为绿色菌落,创伤和拟态弧菌都不发酵蔗糖,需进一步确证鉴定,霍乱弧菌发酵蔗糖为黄色。

副溶血性弧菌为绿色菌落

弧菌显色培育种植提拔基

配方中卵白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑止大部门非弧菌细菌,氯化钠可维持均衡的浸透压;琼脂是培育种植提拔基的凝集剂;混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发作特同性反响,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上发作品白色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。

副溶血性弧菌为品(紫)白色菌落

3%氯化钠胰卵白胨大豆琼脂

胰卵白胨、大豆卵白胨提供氮源、维生素、成长因子;高含量氯化钠能够抑止非弧菌类细菌成长,不影响副溶血性弧菌成长;琼脂为凝集剂。

氧化酶试验

Ø 原理:氧化酶使细胞色素C氧化,氧化型细胞色素C再氧化对苯二胺试剂构成紫色复合物,发作颜色反响。

操作:滴加1滴氧化酶试剂到一小块干净滤纸上,用玻棒或接种环(铂或塑料)挑取适当鲜活菌苔涂在试剂润湿的纸片上;30秒内呈现蓝紫色为阴性,提早反响或无颜色变更为阴性。

3%氯化钠三糖铁琼脂

卵白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物资;乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类,其产酸时经由过程酚红批示剂测出,酸性呈黄色,碱性呈白色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢,与硫酸亚铁中的铁盐天生玄色硫化铁;较高含量的氯化钠维持弧菌均衡的浸透压;琼脂是培育种植提拔基的凝集剂。

副溶血性弧菌在3%氯化钠三糖铁琼脂上的特色

嗜盐性试验

挑取纯培育种植提拔的单个可疑菌落,划分接种0%、6%、8%和10%差别氯化钠浓度的胰胨水,36℃±1℃培育种植提拔24 h,察看液体混浊情形。副溶血性弧菌在无氯化钠和10%氯化钠的胰胨水中不成长或强劲成长,在6%氯化钠和8%氯化钠的胰胨水中成长旺盛。

赖氨酸脱羧酶试验培育种植提拔基

具备氨基酸脱羧酶的细菌,能合成氨基酸使其脱羧天生胺(赖氨酸→尸胺)和二氧化碳,使培育种植提拔基变碱,使批示剂显示进去。

结果判读:阴性为试验管为绿色-蓝绿色,对照管变黄色; 阴性为试验管和对照管均变黄色,或均不变色。

3%氯化钠甘露醇发酵试验

绝大大都细菌哄骗糖(醇)类作为碳源和动力,代谢产酸(如乳酸、醋酸、丙酸等),使酸碱批示剂变色来断定。

(批示剂为溴甲酚紫)结果判读:阴性为变黄色; 阴性为紫色。

3%氯化钠甘露醇发酵试验

3%氯化钠葡萄糖磷酸盐胨水(VP试验)

某些细菌能合成葡萄糖发作丙酮酸,并进一步将丙酮酸脱羧成为乙酰甲基甲醇,前面在碱性环境下被空气中的氧氧化成为二乙酰,进而与培育种植提拔基中的精氨酸等所含的胍基结合,构成白色的化合物,即VP试验阴性。

我妻氏血琼脂(神奈川试验)

酵母膏粉、卵白胨提供氮源、维生素、成长因子;高含量氯化钠能够抑止非弧菌的细菌成长,不影响副溶血性弧菌成长;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;甘露醇为可发酵的醇;结晶紫抑止革兰氏阴性菌,出格抑止革兰氏阴性杆菌和粪链球菌;兔血红细胞用于检测副溶血性弧菌是不是具备特定溶血素;琼脂为凝集剂。

阴性结果为菌落周围呈半通明环的β溶血。

副溶血性弧菌神奈川试验阴性

ONPG试验

β-半乳糖苷酶试验是以有些细菌可发作β半乳糖苷酶,能合成邻硝基酚-β半乳糖苷(ONPG),天生黄色的邻硝基酚。

ONPG试验